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9個(gè)步驟學(xué)會(huì)淀粉酶試劑盒的使用方法
更新時(shí)間:2022-04-20   點(diǎn)擊次數(shù):1207次
 
  淀粉酶試劑盒是用于體外測(cè)定人體血清或尿液中淀粉酶含量及活力的檢測(cè)儀器。人血清α-淀粉酶主要來(lái)源于胰腺和唾液腺,其測(cè)定是急性胰腺炎的主要診斷指標(biāo)。
 
  淀粉酶試劑盒的使用方法:
 
  1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
 
  2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50μl于反應(yīng)孔內(nèi)。
 
  3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50μl于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50μl于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50μl的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
 
  4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
 
  5.每孔加入80μl的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
 
  6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
 
  7.每孔加入底物A、B各50μl,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
 
  8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50μl終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
 
  9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值(OpticalDensity:吸光度)。
 
  如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
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