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通蔚科研師帶你一起用心挑選ELISA試劑盒
更新時間:2017-08-03   點(diǎn)擊次數(shù):1301次

ELISA這個方法的原理,大家都很明白,可真正用起來的時候,偶然間就會有點(diǎn)犯糊涂,怎樣靈活應(yīng)用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA試劑盒。有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG,IgE等指標(biāo)。
 

ELISA檢測方法簡單,靈敏度高,為ELISA檢測血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等。很多客戶有個誤區(qū),拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,該檢測活性的檢測活性。

 

對付一些小分子的檢測,例如:前線腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒試劑盒。ELISA試劑盒一般細(xì)胞因子的檢測,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或多個抗原表位。

 

小分子很難找到兩個不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)志的檢測抗體,顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高,吸光度越低。
 
 

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