上海通蔚生物科技有限公司終年供給ELISA試劑盒,為確保試驗的成功,使用ELISA試劑盒時必定要注意相關的事項,今日,我們主要介紹人白介素ELISA試劑盒操作過程。
1, 確認本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目。
2, 將倍比稀釋的規(guī)范品各0.1ml順次參加一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔參加。
3, 酶標板加上蓋,37℃反響90分鐘。
4, 反響后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。洗刷2次。
5,將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響60分鐘。
6, 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次,每次浸泡1分鐘左右。
7,將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml順次參加。37℃反響30分鐘。
8, 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次,ELISA試劑盒每次浸泡1-2分鐘左右。
9, 按每孔0.1ml順次參加TMB顯色工作液,37℃避光反響,反響過程中,要常常的調查,當肉眼可見規(guī)范品的前3-4孔有顯著的梯度藍色,后3-4孔不同不顯著時,即可參加TMB停止液0.1ml/孔。(顯色反響長不要超越30分鐘)。
10,用酶標儀在450nm測定O.D.值。
11,根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也能夠使用各種應用軟件來核算。應記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應該×N。
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