ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理有哪些呢?本文為你詳細(xì)講解關(guān)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理。
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
優(yōu)勢(shì):
1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn);
2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3、產(chǎn)品質(zhì)量保證,提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
性能特點(diǎn):
1、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900;
2、靈敏度:檢測(cè)濃度小;
3、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng);
4、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%;
ELISA試劑盒的選擇方法:
1、特異性:試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分,抗體對(duì)有關(guān)。若抗體對(duì)中為多抗,另一個(gè)有必要為單抗,建議運(yùn)用雙單抗。挑選一個(gè)好的試劑盒,咱們首先要考慮的就是特異性。
2、靈敏度:試劑盒的好壞往往就取決于靈明度的高低,因而靈敏度也是咱們挑選試劑盒的一個(gè)重要技術(shù)參數(shù)。靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的才能,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選合適的試劑盒,假如待檢目標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可挑選高敏的試劑盒。
3、重復(fù)性:科學(xué)實(shí)驗(yàn)講究重復(fù)性,一般試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。